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背根節(jié)初級感覺神經(jīng)元的溫度敏感性
作者：張磊，王玉英，董輝，胡三覺【關(guān)鍵詞】 溫度敏感性；膜片鉗術(shù)；神經(jīng)節(jié),脊；神經(jīng)元
【Abstract】 AIM: To study the effects of temperature on mediumdiameter primary sensory neurons in rat dorsal root ganglion (DRG). METHODS: Wholecell patchclamp recording was performed on mediumdiameter DRG neurons freshly isolated from rats for observing the firing characteristics by temperature gradient stimulation. RESULTS: According to the firing characteristics of the primary sensory medium neurons to the temperature changes in rat DRG, there were 2 classes of cells: In class Ⅰ, the medium neuron was temperaturesensitive neuron. Allornone action potentials could be generated and the number of spikes and the frequency decreased with increase of the temperature, and vice versa. The coldsensitive neuron was voltage dependent. In class Ⅱ, the medium neuron was temperatureinsensitive neuron. It only had single action potential with increase or decrease of the temperature, and the amplitude of the single action potential decreased with increase of the temperature. CONCLUSION: The two classes of rat DRG medium neurons have different thermosensitivity.
【Keywords】 thermosensitivity; patchclamp techniques; ganglia, spinal; neurons
【摘要】 目的： 觀察大鼠背根節(jié) (DRG) 中型神經(jīng)元的溫度敏感性. 方法： 在新鮮分散的大鼠背根節(jié)中型神經(jīng)元運(yùn)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，觀察給予不同溫度梯度刺激下引起細(xì)胞放電的特征. 結(jié)果： 根據(jù)大鼠背根節(jié)中型神經(jīng)元在不同溫度梯度刺激下的放電特征可將它們區(qū)分為兩類溫度敏感神經(jīng)元. Ⅰ類神經(jīng)元的溫度敏感性與冷溫度變化密切相關(guān)，隨著溫度的升高而引發(fā)的逐漸增強(qiáng)的膜電位超級化可引發(fā)頻率由高到低的動(dòng)作電位. 隨著溫度的降低神經(jīng)元又表現(xiàn)出頻率由低到高的動(dòng)作電位變化. 動(dòng)作電位的幅值一致，符合“全或無”定律. 該類神經(jīng)元具有電壓依賴性. Ⅱ類神經(jīng)元的興奮性與溫度變化的關(guān)系不明顯，隨著溫度升高或降低，神經(jīng)元只出現(xiàn)一個(gè)動(dòng)作電位，其頻率沒有變化，僅僅表現(xiàn)在隨溫度升高，動(dòng)作電位的幅值降低，溫度降低后，其幅值又恢復(fù). 結(jié)論： 大鼠DRG兩類神經(jīng)元在溫度變化一致的情況下各具不同的冷溫度敏感性.
【關(guān)鍵詞】 溫度敏感性；膜片鉗術(shù)；神經(jīng)節(jié),脊；神經(jīng)元
0引言
為了生存和適應(yīng)自然界各種變化, 溫度感受是動(dòng)物最基本的生物行為. 動(dòng)物通過特殊的溫度感受器來感知冷和熱. 依據(jù)細(xì)胞所具有不同的冷熱溫度感受器，可簡單將其溫度敏感性分為三類. 這種分類在神經(jīng)系統(tǒng)具有一定的普遍性［1-2］. 背根節(jié) (dorsal root ganglion, DRG) 是外周感受信號傳向中樞所經(jīng)的第一站，節(jié)內(nèi)細(xì)胞復(fù)雜多樣，其中中、小型細(xì)胞傳遞的信息和冷熱覺的關(guān)系密切. 目前關(guān)于背根節(jié)小細(xì)胞和冷溫度敏感性關(guān)系的研究報(bào)道較多［3-5］，但有關(guān)中型細(xì)胞和溫度感受及傳遞關(guān)系的研究較少. 本研究采用全細(xì)胞膜片鉗方法初步探討背根節(jié)上中型神經(jīng)元的溫度敏感性，旨在深入了解初級感覺神經(jīng)元在溫度感受與傳遞中的作用機(jī)制.
1材料和方法
1.1材料SD大鼠體質(zhì)量50~60 g，雌雄不拘，由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供； 胰蛋白酶 (Ⅰ型)，膠原酶 (Ⅲ型)，MgATP均購自美國Sigma公司；Axon200A放大器，美國Axon公司；半導(dǎo)體溫度計(jì) (7151型)，上海醫(yī)用儀表廠.
1.2方法急性分離DRG細(xì)胞后，進(jìn)行全細(xì)胞膜片鉗記錄. 實(shí)驗(yàn)在40個(gè)DRG細(xì)胞上進(jìn)行記錄，靜息膜電位為：(-52.0±3.2) mV．
1.2.1DRG細(xì)胞的制備SD大鼠在戊巴比妥鈉 (40 mg/kg, ip) 麻醉下，迅速取出胸腰段DRG，置于氧飽和的RPMI 1640液中，仔細(xì)剪除多余的神經(jīng)纖維后將神經(jīng)節(jié)置于含酶的RPMI 1640液中 (
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