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臨床微生物檢驗(yàn)之病原性真菌檢驗(yàn)知識(shí)
真菌是一大類(lèi)不含葉綠素，無(wú)根、莖、葉，由單細(xì)胞或多細(xì)胞組成的真核細(xì)胞型微生物。大部分真菌對(duì)人類(lèi)有益，能引起人類(lèi)疾病的病原性真菌主要包括淺部真菌和深部真菌。下面是yjbys小編為大家?guī)?lái)的病原性真菌檢驗(yàn)的知識(shí)，歡迎閱讀。
一、常見(jiàn)單細(xì)胞真菌的形態(tài)觀察
1、新型隱球菌墨汁負(fù)染色片：可見(jiàn)菌體呈球形，大小不一，有很厚的莢膜，包圍在菌體周?chē)该靼l(fā)亮，并可見(jiàn)發(fā)芽的菌體。
2、白色念珠菌菌體形態(tài)：用患者的棉拭子標(biāo)本常法涂片，革蘭氏染色，鏡檢。顯微鏡下可見(jiàn)菌體呈卵圓形，較葡萄球菌大2-5倍，細(xì)胞出芽伸長(zhǎng)而成假菌絲，在假菌絲生長(zhǎng)點(diǎn)上有芽生孢子及沿假菌絲頂端生長(zhǎng)的大而圓的厚膜孢子。
二、皮膚絲狀菌的檢查
材料：
病人的甲屑、皮屑或毛發(fā)、10%KOH溶液、載玻片、蓋玻片、小鑷子、普通光學(xué)顯微鏡等。
方法：
1、采標(biāo)本：用鈍刀在手、足、體癬損害部位邊緣輕輕刮取皮屑，甲癬可用小刀刮取病損指(趾)甲深層碎屑。
2、制片：用小鑷子取少許皮(甲)屑標(biāo)本置于載玻片中央，滴1-2滴10%KOH溶液，覆加一蓋玻片，在火焰上緩慢加熱，以加速角質(zhì)溶解，使標(biāo)本透明，然后輕輕加壓使成薄片，驅(qū)走氣泡并吸去周?chē)缫骸?/p>
3、鏡檢：先用低倍鏡觀察有無(wú)真菌菌絲或孢子，再用高倍鏡觀察菌絲、孢子的特征。鏡檢時(shí)光線應(yīng)稍弱，使視野稍暗。陽(yáng)性標(biāo)本常可查見(jiàn)分支菌絲或孢子。
三、真菌的培養(yǎng)
材料：
菌種、沙保氏培養(yǎng)基、平皿、載玻片、蓋玻片。
方法：
1、一般培養(yǎng)：分別將新型隱球菌、白色念珠菌、絮狀表皮癬菌接種于沙保氏培養(yǎng)基，于22℃-28℃下培養(yǎng)(深部真菌可培養(yǎng)于37℃環(huán)境)，一周后觀察菌落特征。真菌菌落在形態(tài)上可分為三大類(lèi)：
酵母型菌落：與細(xì)菌菌落相似，圓形、白色、邊緣整齊、表面光滑濕潤(rùn)。
類(lèi)酵母型菌落：同酵母型菌落，圓形、較大、白色，但菌落根部有假菌絲長(zhǎng)入培養(yǎng)基內(nèi)。
絲狀菌落：是多細(xì)胞真菌的菌落形式。有許多疏松的菌絲體構(gòu)成，菌落呈棉絮狀、絨毛狀或粉末狀，菌落中央有皺折，外圍有放射狀溝。其正面和背景又可顯示各種不同顏色。
2、小培養(yǎng)(玻片法)：在無(wú)菌平皿中先傾注10-15ml沙保葡萄糖瓊脂，待凝固后，無(wú)菌操作將瓊脂切成約0.5cm的方塊，再將瓊脂塊移放在滅菌的載玻片上，然后在小塊培養(yǎng)基四邊接種已分純的真菌菌種，蓋上無(wú)菌蓋玻片，移入有一定濕度的無(wú)菌平皿內(nèi)，置22℃-28℃孵育。動(dòng)態(tài)觀察生長(zhǎng)過(guò)程，根據(jù)菌絲和孢子的特點(diǎn)鑒定真菌類(lèi)別。
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