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微生物檢測操作工個人工作總結
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自從本人接管微生物實驗室以來,發生過大大小小的實驗室偏差,現在就各類偏差現象談談個人看法:
由于微生物的特殊性,微生物檢測異常結果的調查與評價較理化檢測更為復雜和困難,因為
1樣品在環境中的均一性較差(即 分布不均)
2微生物的不穩定性--因為藥品檢驗的對象是具有繁殖能力的活細胞生物,其能因存放時間的延長而死亡亦或大量繁殖
3檢驗周期長--需待其形成肉眼可見的菌落,一般需72小時
4檢驗過程中影響因素較多,如微生物的生理狀態,樣品的抑菌性,培養基靈敏度,培養溫度
所以,盡管我們執行檢驗規程和sop,在實際操作中也難免會有實驗室偏差,因此微生物實驗室有必要制定適當的偏差處理方法,
個人認為:對于微生物實驗室偏差,檢驗員應端正心態,以科學嚴謹的態度去面對,切勿隱瞞(特別是超標偏差), 當出現偏差,當事檢驗員應有清晰的分析思路:從一切可能的角度去調查,從而有針對性的去處理偏差,得出正確的實驗結果..實驗室負責人應在接到異�；虺瑯私Y果的報告后,及時向部門經理匯報情況,
然后按以下步驟進行調查分析偏差原因并作出適當處理,
1檢查所有的 玻璃儀器,工具,溶液,樣品是否正確
微生物限度檢驗所用玻璃儀器,稀釋劑:極少會出現染菌現象, 因為其滅菌規程成熟且簡便,一般可對其進行徹底滅菌,若還是出現問題,則可能是設備性能不達標或保存過程中受到污染了.
另:如研缽等能用干熱滅菌的器皿則盡量用干熱法滅菌,因為濕熱法滅菌后的物品會因帶有水蒸氣--冷凝而成少量水附著于物品表面和內壁,若不及時將其烘干,則易滋生微生物造成不必要的污染,
2與檢驗員討論檢驗方法,確認無方法和操作方面的問題
微生物限度檢查中制備供試液所用到的乳化劑,分散劑有聚山梨酯80,十四烷酸異丙脂,其能將一些非水溶性的供試品(硬脂酸鎂)在稀釋劑里充分混勻,達到"供試液均勻一致"的效果,使被檢樣品更具代表性,為了便于觀察某些細菌,在細菌檢查培養基中還可加入一顯色劑,如TTC,其最終濃度為0.001%,若過高則會對細菌的生長有抑制作用
在檢查抗菌藥物時,可以在供試液制備過程中(或在培養基里)加入中和劑,其用量應在方法驗證過程中確定.
例1:在檢查青霉素類藥物如 阿莫西林膠囊時,則可在稀釋劑或培養基中加入青霉素酶,其能完全特異,迅速的使青霉素滅活,,從而使青霉素失去抑菌,殺菌的作用.
例2:在檢查喹諾**類抗菌藥時,可根據其理化性質:3,4位羧基與**羰基,容易和金屬離子如,鈣,鎂,鐵,鋅等形成螯合物降低藥物的活性.在稀釋劑或培養基中加入MnSO4(0.1mol/L)
3檢查在相關時間段其他樣品或同類樣品的檢測結果 和 微生物菌落形態
也可參考當天/當次檢驗其他檢品的檢驗結果,有類似異常情況發生,可根據所檢查微生物菌落形態作出相應的判斷.微生物在液體培養基(如營養肉湯,改良馬丁培養基)中的培養特征會有:形成菌膜/形成沉淀/渾濁,在固體培養基(營養瓊脂,玫瑰紅鈉瓊脂)上的形態有:菌落表面形態—圓形,根狀,不規則形,菌落隆起形狀—隆起,扁平,凸起,臍狀凸起,菌落邊緣形狀—邊緣整齊,裂葉狀,波狀,絲狀,鋸齒狀,
舉例:金黃色葡萄球菌,在營養瓊脂平板上,經37度培養24-48小時后,產生金黃色脂溶性色素,呈金黃色,菌落較小,,直徑多在0.8-1.5mm之間,圓形,凸起,邊緣整齊,表面光滑,濕潤,不透明之菌落.
4潔凈室潔凈度的控制
為了維護醫藥實驗用潔凈室環境的穩定性,確保實驗結果的準確性,對潔凈室環境質量應采取合理的控制措施和評價方法是非常重要的無菌技術主要指在微生物實驗工作中,控制或防止各類微生物的污染及其干擾的一系列操作方法和有關措施,其中包括無菌環境設施無菌實驗器材以及無菌操作等,無菌環境是指人們用物理的或化學的方法,在某一可控的空間內使微生物數量降低到最低限度,接近于無菌的一種空間,醫藥企業中，消毒與滅菌是微生物實驗技術中最基本的操作，消毒是指對病原微生物的繁殖體的致死作用，但不能殺死芽孢等全部微生物.所以,消毒是不徹底的,不能代替滅菌.凡用于消毒的化學藥品稱為消毒劑,其有液體的,固體的,和氣體的，消毒劑種類很多,性質不一,因此應根據具體情況選擇既安全又有效的消毒劑.關于消毒劑的類型于影響因素詳見 本人的PPT資料<消毒劑>.
無菌操作一般是指在無菌環境條件下,使用無菌制品或無菌器材進行檢驗或實驗的過程中,能防止微生物污染與干擾的一種常規操作方法,其目的有一是保證待檢驗物不被環境中的微生物污染,二防止被檢微生物在操作中污染環境或感染操作人員,個人認為:藥品微生物限度檢驗無菌操作,應遵循"有菌觀念,無菌操作"的原則,嚴格按SOP進行各項無菌操作,詳見<藥品微生物檢驗學手冊>308頁, :檢驗員應在無菌操作的基礎上,盡量提高操作的準確性,進一不提高檢驗結果的準確性
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