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  • 綠色熒光蛋白標記的人血管內皮生長因子165基因重組腺病毒載體的

    時間:2024-07-07 05:23:50 臨床醫學畢業論文 我要投稿
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    綠色熒光蛋白標記的人血管內皮生長因子165基因重組腺病毒載體的

    畢業論文

    全部作者: 田衛東 白曉峰
    第1作者單位: 4川大學華西口腔醫學院口腔頜面外科
    論文摘要: 目的 構建攜帶綠色熒光蛋白的高效重組腺病毒載體AdGFP/hVEGF165。方法 應用重組腺病毒構建系統,以細菌內質粒間同源重組法構建復制缺陷型重組腺病毒載體。首先將VEGF165cDNA亞克隆到穿梭質粒pAdTrack-CMV上,重組穿梭質粒經PmeⅠ酶切線性化后,轉入已含有腺病毒骨架載體的BJ5183中。同源重組后,重組的病毒質粒pAdGFP/ hVEGF165經卡那霉素平板篩選獲得。經酶切分析鑒定后,重組病毒質粒用PacⅠ酶切線性化,通過脂質體Lipofectamine2000轉染人胚腎293細胞。經過包裝、擴增和純化后,測定病毒滴度。結果 重組腺病毒質粒經PacⅠ酶切鑒定,在凝膠電泳中獲得診斷性片段,轉染的293細胞出現了明顯的細胞病變效應。PCR鑒定括增出測定相應的片段。重組腺病毒的滴度為:6×109pfu/m。結論 應用重組腺病毒構建系統,以細菌內質粒間同源重組法可成功地獲得重組腺病毒載體AdGFP/hVEGF165,重組腺病毒載體中含有GFP的標記基因可直觀檢測靶細胞轉染和外源基因的表達情況,為今后深入研究VEGF基因治療奠定實驗基礎。
    關鍵詞: 腺病毒載體,血管內皮生長因子,同源重組 遠程下載 論文(免費PDF論文全文)
    發表日期: 2005年06月13日
    同行評議:

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    修改稿:

    【綠色熒光蛋白標記的人血管內皮生長因子165基因重組腺病毒載體的】相關文章:

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