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  • 臨床免疫檢驗(yàn)常用的分析技術(shù)

    時(shí)間:2024-10-18 07:21:55 檢驗(yàn)技師/士 我要投稿
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    臨床免疫檢驗(yàn)常用的分析技術(shù)

      臨床免疫檢驗(yàn)常用的分析技術(shù)有哪些你知道嗎?下面是yjbys小編為大家?guī)淼呐R床免疫檢驗(yàn)常用的分析技術(shù)的知識(shí),歡迎閱讀。

      一、免疫標(biāo)記技術(shù):2種分類

      1.(1) 免疫組化技術(shù)(immunohistochemical technique): 用于組織切片或其他標(biāo)本中抗原抗體的定位(2)免疫測(cè)定(immunoassay): 用于液體標(biāo)本中抗原或抗體的測(cè)定.

      2.(1) 免疫熒光技術(shù) (2) 酶免疫技術(shù) (3) 放射免疫技術(shù)(4) 金標(biāo)技術(shù)(5)化學(xué)發(fā)光技術(shù)

      酶免疫技術(shù)—固相酶免疫技術(shù)―酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)

      ELISA方法類型與操作步驟

      雙抗體夾心法:檢測(cè)抗原最常用的方法

      原理(操作步驟): (1) 特異性抗體包被載體形成固相抗體. (2) 洗去未結(jié)合的抗體和雜質(zhì). (3) 加入待測(cè)樣品,使其中相應(yīng)抗原和固相抗體呈特異性結(jié)合成復(fù)合物. (4) 再洗滌除去未結(jié)合的物質(zhì).(5) 加酶標(biāo)抗體,使之與固相上的抗原呈特異性結(jié)合.(6) 經(jīng)充分洗滌后除去未結(jié)合的游離酶標(biāo)記抗體.(7) 加入相應(yīng)酶的底物,固相化的酶催化底物變成有色產(chǎn)物,顏色反應(yīng)的程

      度與固相上抗原的量有關(guān).

      適用范圍:檢測(cè)抗原的最常用方法 ,用此方法檢測(cè)的抗原,應(yīng)至少有2個(gè)以上結(jié)合位點(diǎn),故不能用以測(cè)定半抗原物質(zhì)。

      2、競(jìng)爭法:(可用于測(cè)定抗原或抗體)

      原理(操作步驟):以測(cè)定抗原為例(1) 將特異性抗體包被載體,使形成固相抗體,(2) 洗去雜質(zhì),待測(cè)孔中同時(shí)加待測(cè)標(biāo)本和酶標(biāo)記抗原,使之與固相抗體反應(yīng)。如待測(cè)標(biāo)本中含有抗原,則與酶標(biāo)記抗原共同競(jìng)爭結(jié)合固相抗體。待測(cè)標(biāo)本中抗原量越多,酶標(biāo)記抗原結(jié)合量越少(3) 洗滌除去游離酶標(biāo)記物后,加底物顯色(4) 結(jié)果是不含受檢抗原的對(duì)照孔,其結(jié)合的酶標(biāo)記抗原最多,顯色最深。對(duì)照孔與待測(cè)孔顏色深度之差代表受檢標(biāo)本中的抗原量。待測(cè)孔越淡, 標(biāo)本中抗原量越多。

      3、間接法:(可檢測(cè)各種相應(yīng)抗體)

      原理(操作步驟):(1) 將特異性抗原包被載體,使形成固相抗原; (2) 洗去未結(jié)合的物質(zhì),加入待測(cè)樣品,使其中待測(cè)的特異性抗體與固相抗原相結(jié)合形成固相抗原抗原復(fù)合物;(4)再經(jīng)洗滌后,固相上僅留下特異性抗體; (5) 加酶標(biāo)抗人球蛋白(酶標(biāo)抗抗體),使與固相復(fù)合物中抗體結(jié)合,從而使待測(cè)抗體間接標(biāo)記上酶;(6) 洗滌除去多余的酶標(biāo)抗體,固相結(jié)合酶量就代表待測(cè)抗體的量; (7) 最后加入底物顯色,其顏色深淺可代表待測(cè)抗體量。

      免疫熒光法---抗核抗體的檢測(cè)

      二、沉淀反應(yīng)

      可溶性抗原與相應(yīng)抗體特異性結(jié)合所出現(xiàn)的反應(yīng)。反應(yīng)分為兩個(gè)階段:(1) 抗原抗體特異性結(jié)合;(2) 形成可見的免疫復(fù)合物。

      三、凝集反應(yīng)

      細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后,出現(xiàn)肉眼可見的凝集(agglutination)現(xiàn)象。

      凝集反應(yīng)的發(fā)生分為兩個(gè)階段:(1)抗原抗體的特異結(jié)合;(2)出現(xiàn)可見的顆粒凝聚。

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